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N和C末端分别侧接FKBP 和DHFR drogon,每个dragon都有不同的切割位点。在N末端,亮氨酸拉链是促进输入蛋白酶对接所必需的。在这种设计中,为了稳定蛋白质,去除两个dragon是必要的。第三,为了实现否定,我们要么使用N -末端degron策略,要么通过中间蛋白酶抑制步骤传播信号。每个基本门( OR,AND,NOR,作为否定的具体情况)与其输入的不同浓度的共传输揭示了预期的逻辑功能。此外,改变报告质粒的浓度使得能够在不中断逻辑计算的情况下调节输出水平,有助于在更复杂的电路中匹配输入和输出水平。最后,通过使用HCVP抑制剂亚松森普雷维和雷帕霉素诱导的TEVP,我们发现这些门也可以由小分子输入控制。因此,这些结果表明,三个核心门在多种输入方法中表现出稳健和可调的操作。
与转录系统相比,CHOMP电路可以提供不同的功能。就速度而言,蛋白酶可以快速响应输入蛋白酶活性的增加。CHOMP电路也可以在细胞内的特定亚细胞位置并行工作。因为CHOMP电路具有相对紧凑的基因设计,并且不需要与DNA的调节性相互作用,所以它们可以通过基因治疗载体或其他病毒被引入分化的甚至死后的细胞中,并且可以提高溶瘤病毒治疗的特异性。综合来看,将转录或翻译调节与工程蛋白酶结合起来的混合电路可以提供碱基配对相互作用的可编程性以及蛋白质水平的操作。例如,现有的癌症检测电路可以有条件地表达CHOMP成分,以增加特异性,并耦合到蛋白质介导的输入和输出。综合这些能力,人们可以想象基于CHOMP电路的智能疗法。返回搜狐,查看更多