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生物化学 第二章 蛋白质化学 下pptDogecoin - An open-source peer-to-er digital currency

作者:小编2024-12-04 13:52:19

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  四 超二级结构和结构域;; 结构域(Structural Domain)是介于二级和三级结构之间的一种结构层次。是指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域,是蛋白质三级结构内的独立折叠单元。结构域通常都是几个超二级结构单元的组合。 结构域与结构域之间常常有一段长短不等的肽链相连,形成所谓铰链区。不同蛋白质分子中结构域的数目不同,同一蛋白质分子中的几个结构域彼此相似或很不相同。常见结构域的氨基酸残基数在100~400个之间,最小的结构域只有40~50个氨基酸残基,大的结构域可超过400个氨基酸残基。 结构域一般都具有一定的功能 。也叫模体(motif)或基序;;;?-螺旋;五 球状蛋白的三级结构;;;六 蛋白质四级结构;?1;;第四节 蛋白质结构与功能关系;;; ; 动物体细胞色素C一级结构的进化树 图中的数字表示该类动物与其祖先相比细胞色素C一级结构氨基酸残基的差异数; 0 1 0 12 11 0 11 10 1 0 10 9 3 2 0 11 10 6 5 3 0 10 9 5 4 2 3 0 9 8 6 5 4 5 2 0 10 11 7 8 6 7 6 6 0 13 12 11 10 9 10 9 8 12 0 13 12 12 11 10 10 9 8 10 2 0 11 10 10 9 8 8 7 6 10 3 3 0 14 15 22 21 20 21 19 18 21 19 20 17 0 15 14 11 10 9 9 8 9 11 8 8 7 22 0 18 17 14 13 11 12 11 11 13 11 12 11 24 10 0 21 21 19 18 17 18 17 17 18 17 18 17 26 18 15 0 27 26 22 22 22 21 22 21 24 23 24 22 29 24 22 24 0 31 30 29 28 27 25 27 26 28 28 27 27 31 28 29 32 14 0; 磷酸丙糖异构酶和丙酮酸激酶结构域1空间构象的相似性 磷酸丙糖异构酶催化3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮的互变,丙 酮酸激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸转移磷酸基生成ATP和烯醇式 丙酮酸,但其空间结构具有相似性,其空间结构的中心均是由 8个?-折叠组成的?-折叠桶,每个?-折叠又被?-螺旋所分隔;;朊病毒与蛋白质构象病; 正常朊病毒蛋白与朊病毒空间结构的差异 朊病毒(PrPsc)是蛋白质,不含核酸。它是正常朊病毒蛋白(PrPc)的空间 构象由?-螺旋变成?-片层结构所致。因此,这类疾病又称蛋白质构象病。朊病毒 本身不能复制,但它却可以攻击大脑的正常朊病毒蛋白,使其发生构象改变, 并与其结合,成为致病的朊病毒二聚体。此二聚体再攻击正常的朊病毒蛋白。这 样,脑组织中的朊病毒不断积蓄,造成脑组织发生退行性变。 ;具体几种蛋白的功能; 人胰岛素的一级结构 胰岛素由A、B两条多肽链组成,A链含21个氨基酸残基,B链含30个氨基酸残基。A链内有一个链内二硫键,A与B之间有两个链间二硫键。由于两条链之间由共价键相连接,所以胰岛素没有四级结构。;;;胞外区;;第五节 蛋白质性质;透析(dialysis):;形成稳定胶体溶液的因素: 水化膜和同性电荷;二 两性解离和等电点; 三 蛋白质变性作用和复性 ; 牛胰核糖核酸酶分子的变性与复性 变性是指蛋白质在一些理化因素的作用下,其正常的空间构象遭到破坏,主要是次级键或二硫键发生破坏,导致蛋白质的理化性质的改变(如溶解度下降、粘度增加)和生物学活性的丧失。蛋白质的变性不影响其一级结构。;变性;蛋白质变性(Denaturation) 蛋白质复性(Renaturation) 四 蛋白质沉淀(sedimentation)作用 precipitation(沉淀); Aggregation(凝集) 1 中性盐法 盐析(salting-out);分段盐析(grading salting-out) 重金属盐 2 有机溶剂 乙醇;丙酮 3 生物碱 单宁酸;苦味酸 4 有机酸 三氯乙酸 ;第六节 蛋白质分离纯化与测定; ;(一)改变蛋白质的溶解度;(二)根据蛋白质分子大小不同的分离方法;匀浆; ;透析(dialysis):;超滤(ultrafiltration): 在一定的压力下,使蛋白质溶液在通过一定孔径的 超滤膜时,小分子量物质滤过,而大分子量的蛋白质被 截留,从而达到分离纯化的目的。这种方法既可以纯化 蛋白质,又可达到浓缩蛋白质溶液的目的。 ;凝胶过滤(gel filtration): 凝胶过滤又称分子筛层析,在层析柱内填充惰性的 微孔胶粒(如交联葡聚糖),将蛋白质溶液加入柱上部 后,小分子物质通过胶粒的微孔进入胶粒,向下流动的 路径加长,移动缓慢;大分子物质不能或很难进入胶粒 内部,通过胶粒间的空隙向下流动,其流动的路径短, 移动速度较快,从而达到按不同分子量将溶液中各组分 分开的目的 ;;;根据各种蛋白质在一定的pH环境下所带电荷种类 与数量不同的特点,将不同蛋白质予以分离。 常用的方法有: 离子交换层析 ??电泳 等电聚焦。 ;;;原点;聚丙烯酰胺凝胶电泳;等电聚焦(isoelectric focusing,IEF):;将第一相胶条 加到第二相电 泳中,走向与 第一相垂直;;分离纯化方法 凝胶过滤法 离子交换法 亲和层析法 高压液相色谱(HPLC) 凝胶电泳(PAGE) 离心法;三 分子量测定;SDS;超速离心 最低分子量法;四 蛋白质纯度鉴定:电泳纯 五 蛋白质含量测定